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    2018年國家技術發明獎提名項目公示

    2018年國家技術發明獎提名項目公示

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    一、項目名稱:扇貝分子育種技術創建與新品種培育

    二、提名意見:

    扇貝是我國海水養殖業的主導產業之一,缺乏良種嚴重制約了產業的健康發展,開發高效的分子育種技術是推動種業快速發展的關鍵要素?!吧蓉惙肿佑N技術創建與新品種培育”這一成果突破了扇貝種業的系列核心技術,發明了成套高通量、低成本全基因組分型技術,開發了貝類分子育種技術和遺傳評估系統,培育出高產抗逆扇貝新品種,并進行大規模產業化推廣養殖。該成果是在國家 973 計劃和863 計劃等多個國家重大項目支持下完成的,系列核心技術突破處于國際前沿,具有原始創新性,在國際方法學頂級雜志 Nature Methods 發表了論文,獲得了國際發明專利等 30 項發明專利和軟件著作權,分子標記輔助選育了第一個貝類品質改良的新品種“海大金貝”和第一個水產類的全基因組選育品種“蓬萊紅 2 號”,引領了我國水產種業的技術進步,整體成果專家評價處于國際領先水平。

    該成果已獲授權發明專利22件,包括2件國際專利,軟件著作權8項,國家審定新品種2個。開發的高通量分型技術和培育的新品種已推廣應用,近三年累計直接產值 33 億余元、利潤 11億余元。2008 至 2017 年,推廣扇貝良種養殖697萬余畝,產量229萬噸,創產值 207億元,社會經濟效益顯著。

    提名該項目為國家技術發明獎二等獎。

    提名單位:山東省科技廳。

    三、項目簡介:

    貝類占我國海水養殖產量近80%,扇貝養殖是其主導產業,良種匱乏是制約產業發展的關鍵因素。分子育種是國際育種技術的研發前沿和競爭熱點。針對水產生物育種基礎薄弱現狀,大力發展分子育種技術,促進水產種業跨越發展,是保障水產養殖業健康可持續發展的重大科技需求?!笆晃濉币詠?,項目組圍繞貝類種業核心技術展開攻關,發明了系列高通量低成本全基因組分型技術,開發了貝類分子育種技術和遺傳評估系統,培育出高產抗逆扇貝新品種,實現大規模產業化推廣養殖,取得顯著社會經濟效益。

    1、創建了新型高效全基因組標記篩查分型技術

    1)建立等長標簽簡化基因組分型技術2b-RAD,解決國際同類技術流程復雜、成本高、靈活性差等問題;發明高通量液相雜交分型技術,可高效檢測SNP、Indel等,且突破SSR標記不能高通量分析局限,費用較商業芯片節省90%以上;開發了首個可實現DNA甲基化精確定量的RAD類技術。2)創新性提出基于混合泊松分布模型的分型算法iML,解決重復序列干擾難題,準確率較國際算法提高20%以上;發明Domcalling分型算法,解決RAD類技術無法利用顯性標記,提高分型效率40%;研發首個可同時分析共顯性和顯性標記的軟件包RADtyping。論文發表于國際方法學頂級刊物Nature Methods等,推動我國水產分子育種技術躍居國際前沿。

    2、研發了貝類分子育種技術與遺傳評估系統

    1)建立貝類分子標記輔助育種技術。構建國際首張精度突破0.5cM的水產生物遺傳圖譜,定位QTL55個,鑒定到生長主效基因Prop1、類胡蘿卜素積累關鍵基因BCO-like1等32個;揭示扇貝應對高溫級聯網絡調控機制,10余個標記已應用于良種選育。建立了集圖譜構建、QTL基因定位及分子標記輔助選育的技術體系,應用BCO-like1基因標記育成“海大金貝”。2)建立多種全基因組選擇育種新算法和模型,開發了LASSO-GBLUP模型,解決了數據降維與精準度沖突的國際難題;研發了第一個貝類全基因組選擇育種評估系統,育成“蓬萊紅2號”扇貝新品種,引領了水產育種技術發展。

    3、開發了扇貝高產抗逆新品種培育技術體系

    1)開發貝類性狀自動測量記錄系統;建立基于心跳頻率的扇貝耐溫性狀精確測定技術;研發LIBS與拉曼光譜的貝殼組分快速分析技術,實現扇貝性狀與環境要素高通量快速測定。2)構建扇貝種質庫、分子育種信息庫、標簽庫和探針庫等。集多種育種技術,與種業企業相結合,構建了扇貝育種網絡平臺。3)應用所研發的分子育種技術,育成系列扇貝新品種。標記輔助選育的富含類胡蘿卜素“海大金貝”開創海水動物品質改良先例,高產抗逆“蓬萊紅2號”為國際首個全基因組選育水產良種。良種良法,推動我國水產種業跨越發展。

    項目近三年直接產值33.56億元、利潤11.49億元。2008至2017年推廣扇貝良種697.40萬余畝,產量229.41萬噸,創產值207.25億元,提供就業崗位18萬余個,社會經濟效益顯著。

    本發明屬水產學基礎學科;獲發明專利22件,軟件著作權8件,新品種2個,發表論文25篇。

    四、客觀評價:

    1、成果評價

    經教育部組織鑒定,以桂建芳院士為組長的專家組評價“項目在新型基因組標記分型技術方面的系列創新,為實現水產生物分子育種提供了關鍵技術支撐;率先開發出貝類全基因組選擇育種評估系統和全基因組選擇技術,培育出櫛孔扇貝‘蓬萊紅2 號’等新品種;形成了扇貝高產抗逆新品種培育和性狀評估技術體系,項目成果取得了重大經濟、社會效益?!?鑒定委員會認為“該項成果在水產生物分子遺傳育種領域達到了國際領先水平”。

    2、國內影響

    1)針對項目組開發的新型高效全基因組分子標記分型技術,十二五國家“863”計劃重大項目驗收意見:“在貝類組學分析新技術、新方法研發方面取得重要突破,成果發表于國際方法學權威期刊《Nature Methods》”。

    2)十一五“863”重大項目驗收評價“研究水平居國際領先”,成果被選為863亮點與典型案列成果,入選“863計劃實施25周年重大成就及典型案列研究”。

    3)十二五“863”專家組驗收評價“全基因組選擇達到實際應用,技術水平處國際前沿”,成果被選為重大標志性成果,領域辦在國內媒體推介“推動了海洋貝類基因組育種發展,全基因組選擇技術研究已應用于育種實踐”。

    3、國際影響

    1)所研發2b-RAD 技術發表于國際方法學權威期刊《Nature Methods》。美國愛達荷大學Andrews博士等在2016 年發表的《Nature Reviews Genetics》中多次評述2b-RAD 技術優勢,認為2b-RAD 技術可有效規避國際同類技術中由于酶切片段長度不等而造成的位點間測序均勻度差的問題。

    美國科學家利用2b-RAD技術在《Science》發表論文(PMID: 26113720)成功定位了與珊瑚耐高溫相關的基因組區段及候選基因位點。所建立的全基因組分型技術系統已被廣泛應用于扇貝、珠母貝、河蟹、海參、對蝦、銀鯽、裙帶菜等水產生物,及擬南芥、水稻、小麥、大豆、花生、馬鈴薯、牛、巴馬豬、線蟲、小鼠等多種農作物、畜牧和模式動物。國際上已多次舉辦針對該技術進行普及推廣的workshop。

    近期在2b-RAD 技術基礎上,項目組成功研發了串聯標簽測序技術(Multi-isoRAD 技術),使得分析成本大大降低,測序成本僅為技術改進前的十分之一。鑒于該技術的新穎性,國際權威期刊《Nature Protocols》特邀發表該技術。

    2)所研發的無參基因組精準SNP 分型新算法和軟件已被2篇《PLoS Genetics》論文所引用(PMID: 23593039 &26828719)。國際F1000權威專家、法國CNRS 中心主任Nicolas Galtier 教授評價iML 算法“解決了重復序列干擾分型準確率的難題”。英國塞恩斯伯里實驗室(TSL)生物信息學首席科學家Dan MacLean博士于2014年在《BMC Genomics》發表綜述文章,重點評述了iML 算法的原理及應用優勢。

    3)已完成的櫛孔扇貝高精度遺傳連鎖圖譜,為國際上水產生物首張精度突破0.5cM 的遺傳圖譜,被國際著名期刊《DNA Research》雜志選為亮點文章(featured article),主編評價為“具有里程碑意義的工作”?!禡olecular Ecology Resources》評審專家高度贊賞項目組所建立的基因網絡分析方法,評價其“毫無疑問地填補了基因表達分析領域的空白,將RNA-seq 分析推進一步,并從中獲得系統性認識是個很好的思路,我們確實從中受益良多”。國際知名貝類學家、美國羅格斯大學郭希明教授于2015年在《Fish & Shellfish Immunology》發表綜述文章,評價項目組在牡蠣高溫耐受的基因網絡調控機制解析方面的研究結果“為理解牡蠣‘獲得性耐熱現象’的產生提供了的分子機理解釋”。

    4)所研發的QuickCI 算法和軟件被以色列特拉維夫大學、英國牛津大學人類遺傳中心、德國費里茨李普曼研究所和意大利比薩高等師范學校等研究單位在人類遺傳病和衰老研究中應用。

    五、推廣應用情況:

    開發的高通量全基因組標記分型技術系統,目前已被廣泛應用于扇貝、珠母貝、河蟹、海參、對蝦、銀鯽、裙帶菜等水產生物,及擬南芥、水稻、小麥、大豆、花生、馬鈴薯、牛、巴馬豬、線蟲、小鼠等多種農作物、畜牧和模式動物。培育的“海大金貝”、“蓬萊紅2號”等扇貝新品種和品系已推廣應用,近三年累計直接產值 33 億元、利潤 11億多元。2008 至 2017 年,推廣扇貝良種養殖697萬余畝,產量229萬噸,創產值 207億元,社會經濟效益顯著。

    六、主要知識產權證明目錄:

    發明專利

    1. Breeding Method for Orange-Adductor-Muscle Scallop(美國專利授權,US 8544415B2

    2. Breeding Method for Orange-Adductor-Muscle Scallop(日本專利授權,特許第5543583號

    3. 一種橘紅色閉殼肌扇貝的培育方法(發明專利授權,ZL 200910231570.0

    4. 高產抗逆櫛孔扇貝與華貴櫛孔扇貝遠緣雜交育種方法(發明專利授權,ZL 200610076943.8

    5. 高產抗逆雜交扇貝品種的育成方法(發明專利授權,ZL 200610076945.7

    6. 一種基于液相分子雜交原理的高通量低成本SNP分型方法(發明專利授權,ZL 201310549040.7

    7. 一種高通量全基因組DNA甲基化檢測技術(發明專利授權,ZL 201310163085.0

    8. 一種用于大規模、高通量基因分型的貝類DNA快速提取方法(發明專利授權,ZL 201310275266.2

    9. 快速分離、篩選貝類微衛星標記的方法(發明專利授權,ZL 200510044796.1

    10. 櫛孔扇貝TGF-β I型受體基因及其SNP位點(發明專利授權,ZL 201210439861.0

    11. 一種蝦夷扇貝生長性狀相關的SNP位點及其檢測和應用(發明專利授權,ZL 201410035028.9

    12. 一種利用心跳作為海灣扇貝親貝選育指標的方法(發明專利授權,ZL 201510515400.0

    13. 一種基于心跳指標的快速評估扇貝抗性的方法(發明專利授權,ZL 201510519545.8

    14. 一種基于扇貝心跳指標的快速選種方法(發明專利授權,ZL 201510515340.2

    15. 利用物理方法誘導異源三倍體扇貝的一種多倍體育種方法(發明專利授權,ZL 200510044799.5

    16. 一種櫛孔扇貝基因的染色體定位方法(發明專利授權,ZL 200810138645.6

    17. 體外擴增特定環形或串聯體核酸的方法(發明專利授權,ZL 200410035814.5

    18. 一種調節海水酸度的海洋生物養殖裝置(發明專利授權,ZL 201510625978.1

    19. 一種餌料藻自動培養與投加裝置(發明專利授權,ZL 201310278454.0

    20. 一種餌料藻自動培養與投加方法(發明專利授權,ZL 201310277425.2

    21. 一種高通量、多種類型分子標記通用的分型技術(發明專利授權,ZL201510307506.1

    22. 一種櫛孔扇貝生長性狀相關的SNP位點及其應用(發明專利授權,ZL201510638440.4

     

    軟件著作權

    23. 貝類遺傳育種分析評估系統V1.0(登記號2010SR038842

    24. 扇貝表型性狀自動測量記錄系統V1.0(登記號2010SR033962

    25. RADtyping:無需參考基因組的單核苷酸多態性(SNP)精準分型軟件V1.0(登記號2014SR028449

    26. LASSO_GBLUP:基于區分主效基因和微效基因的基因組選擇軟件V1.0(登記號2014SR013876

    27. Gsbay:基于bayes方法的基因組選擇軟件V1.0(登記號2012SR044220

    28. Sky:利用分子標記計算關系矩陣的軟件V1.0(登記號2013SR049813

    29. gsim:基因組選擇模擬軟件V1.0(登記號2015SR070443

    30. QuickCI:QTL置信區間快速計算軟件V1.0(登記號2015SR070671

    新品種證書:

    31. 蝦夷扇貝“海大金貝”(品種登記號:GS-01-002-2009

    32. 櫛孔扇貝“蓬萊紅2號”(品種登記號:GS-01-006-2013

    論文及專著

    33. Shi Wang*, Eli Meyer, John K. McKay, Mikhail V. Matz. 2b-RAD: a simple and flexible method for genome-wide genotyping. Nature methods. 2012.9:808-810.

    34. Jinzhuang Dou, Xiqiang Zhao, Xiaoteng Fu, Wenqian Jiao, Nannan Wang, Lingling Zhang, Xiaoli Hu, Shi Wang, Zhenmin Bao*. Reference-free SNP calling: Improved accuracy by preventing incorrect calls from repetitive genomic regions. Biology Direct. 2012, 7: 17.

    35. Xiaoteng Fu, Jinzhuang Dou, Junxia Mao, Hailin Su, Wenqian Jiao, Lingling Zhang, Xiaoli Hu, Xiaoting Huang, Shi Wang*, Zhenmin Bao*.RADtyping: An integrated package for accurate De Novo codominant and dominant RAD genotyping in mapping populations. PLoS ONE. 2013. 8(11): e79960.

    36. Shi Wang, Jia Lv, Lingling Zhang, Jinzhuang Dou, Yan Sun, Xue Li, Xiaoteng Fu, Huaiqian Dou, Junxia Mao, Xiaoli Hu, Zhenmin Bao*. MethylRAD: a simple and scalable method for genome-wide DNA methylation profiling using methylation-dependent restriction enzymes. Open Biology. 2015. 5: 150130.

    37. Jinzhuang Dou, Xue Li, Qiang Fu, Wenqian Jiao, Yangping Li, Tianqi Li, Yangfan Wang, Xiaoli Hu, Shi Wang*, Zhenmin Bao*. Evaluation of the 2b-RAD method for genomic selection in scallop breeding. Scientific Reports. 2016. 6: 19244.

    38. Wenqian Jiao, Xiaoteng Fu, Jinzhuang Dou, Hengde Li, Hailin Su, Junxia Mao, Qian Yu, Lingling Zhang, Xiaoli Hu, Xiaoting Huang, Yangfan Wang, Shi Wang*, Zhenmin Bao*. High-Resolution Linkage and Quantitative Trait Locus Mapping Aided by Genome Survey Sequencing: Building Up An Integrative Genomic Framework for a Bivalve Mollusc. DNA Research. 2014. 21(1): 85-101.

    39. Aibin Zhan, Jingjie Hu, Xiaoli Hu, Min Hui, Mingling Wang, Wei Peng, Xiaoting Huang, Shi Wang, Wei Lu, Changsen Sun, Zhenmin Bao*. Construction of microsatellite-based linkage maps and identification of size-related quantitative trait loci for Zhikong scallop (Chlamys farreri). Animal Genetics. 2009. 40:821-831.

    40. Hengde Li, Jingwei Wang, Zhenmin Bao*. A novel genomic selection method combining GBLUP and LASSO. Genetica. 2015. 143:299-304.

    41. Yueyue Zhang, Lingling Zhang, Jin Sun, Jianwen Qiu, Xiaoli Hu, Jingjie Hu, Zhenmin Bao*. Proteomic analysis identifies proteins related to carotenoid accumulation in Yesso scallop (Patinopecten yessoensis). Food Chemistry. 2014. 14: 111-116.

    42. Xue Li, Xianhui Ning, Jinzhuang Dou, Qian Yu, Shuyue Wang, Lingling Zhang, Shi Wang, Xiaoli Hu*, Zhenmin Bao. An SCD gene from the Mollusca and its upregulation in carotenoid-enriched scallops. Gene. 2015. 564: 101-108.

    43. Ning Li, Jingjie Hu, Shan Wang, Jie Cheng, Xiaoli Hu, Zhenyu Lu, Zhenjian Lin, Weiming Zhu, Zhenmin Bao*. Isolation and identification of the main carotenoid pigment from the rare orange muscle of the Yesso scallop. 2010. Food Chemistry. 118: 616-619.

    44. Liying Feng, Xue Li, Qian Yu, Xianhui Ning, Jinzhuang Dou, Jiajun Zou, Lingling Zhang, Shi Wang, Xiaoli Hu*, Zhenmin Bao*. A Scallop IGF Binding Protein Gene: Molecular Characterization and Association of Variants with Growth Traits. PLoS ONE. 2014. 9(2): e89039.

    45. Huihui Guo, Zhenmin Bao, Jiqin Li, Shanshan Lian, Shi Wang, Yan He, Xiaoteng Fu, Lingling Zhang and Xiaoli Hu*. Molecular Characterization of TGF-β Type I Receptor Gene (Tgfbr1) in Chlamys farreri, and the Association of Allelic Variants with Growth Traits. PLoS ONE. 2012, 7(11): e51005.

    46. Xiaoli Hu, Huihui Guo, Yan He, Shan Wang, Lingling Zhang, Shi Wang,Xiaoting Huang, Scott William Roy, Wei Lu, Jingjie Hu*, Zhenmin Bao. Molecular Characterization of Myostatin Gene from Zhikong scallop Chlamys farreri (Jones et Preston 1904). 2010. Genes Genet. Syst. 85(3): 207-218.

    47. Qiang Fu, Huihui Guo, Liying Feng, Xue Li, Lingling Zhang, Shi Wang, Xiaoli Hu*, Zhenmin Bao*. Association of myostatin variants with growth traits of Zhikong scallop (Chlamys farreri). Journal of Ocean University of China (Oceanic and coastal sea research). 2016. 15(1): 145-151.

    48. Yuan Lu, Yuandong Li, Ying Li, Yangfan Wang, Shi Wang, Zhenmin Bao, Ronger Zheng*. Micro spatial analysis of seashell surface using laser-induced breakdown spectroscopy and Raman Spectroscopy. Spectrochimica Acta Part B: Atomic Spectroscopy. 2015.110:63-69.

    49. Junxia Mao, Jia Lv, Yan Miao, Changsen Sun, Liping Hu, Ru Zhang, Xiaoteng Fu, Lingling Zhang, Xiaoli Hu, Shi Wang*, Zhenmin Bao*. Development of a rapid and efficient method for non-lethal DNA sampling and genotyping in scallops. PLoS ONE. 2013. 8(7): e68096.

    50. Qinglei Meng, Shi Wang, Lingling Zhang, Xiaoting Huang*, Zhenmin Bao. Development of in situ loop-mediated isothermal amplification technique for chromosomal localization of repetitive sequences. Chinese Journal of Oceanology and Limnology. 2013. 31 (1):1-6. 

    51. Qinglei Meng, Zhenmin Bao, Zhaoping Wang, Shi Wang, Jingjie Hu, Xiaoli Hu and Xiaoting Huang*. Growth and reproductive performance of triploid Yesso scallops (Patinopecten yessoensis) induced by hypotonic shock. Journal of Shellfish Research. 2012.31 (4): 1–10.

    52. Aibin Zhan, Xiaoli Hu, Lisui Bao, Wei Lu, Wei Peng, Mingling Wang, Jingjie Hu*. Molecular identification of scallop planktonic larvae using species specific microsatellite. Acta Oceanlogica Sinica. 2008. 27(5): 134-146.

    53. 李恒德,包振民,孫效文*. 基因組選擇及其應用. 遺傳. 2011. 33(12):1308-1316.

    54. 竇錦壯,趙熙強,付曉騰,焦文倩,王南南,張玲玲,胡曉麗,王師*,包振民. 測序錯誤和重復序列對無參照基因組單核苷酸多態性分型的影響. 中國海洋大學學報. 2013, 43(5):120-124.

    55. 陳亮,趙柏淞,李玲,商文聰,胡曉麗,包振民*. 人工誘導櫛孔扇貝雌核發育胚胎的SNP標記分析. 中國海洋大學學報. 2014, 44(2):48-52.

    56. 戰愛斌,胡景杰,胡曉麗,王明玲,彭薇,李艷,李紀勤,包振民. 富集文庫-菌落原位雜交法篩選櫛孔扇貝的微衛星標記. 水產學報. 2008. 32(3): 353-361.

    57. 孟慶磊,黃曉婷,趙海波,趙婷,李寧,王昭平,胡曉麗*,胡景杰,包振民. 扇貝異源三倍體誘導. 2009. 中國水產科學. 16(5): 718-7270.

    58. Zhenmin Bao. Comparison of index selection, BLUP, MAS, and whole genome selection. In: Next generation sequencing and whole genome selection in aquaculture, edited by Zhanjiang Liu. Blackwell Publishing, Ames, IA. 2011, pp. 185-218.

    七、主要完成人:

    1、包振民,教授,中國海洋大學海洋生命學院

    2、王師,教授,中國海洋大學海洋生命學院

    3、胡曉麗,教授,中國海洋大學海洋生命學院

    4、李恒德,研究員,中國水產科學研究院

    5、梁峻,常務副總裁,獐子島集團股份有限公司

    6、王有廷,總經理,煙臺海益苗業有限公司

    八、完成人合作關系說明:

    項目完成人包振民、王師、胡曉麗均為中國海洋大學海洋生命學院教授,長期從事扇貝遺傳學與育種技術研究。包振民教授作為研究團隊帶頭人,負責了項目的整體設計與研發,重點負責貝類全基因組選擇育種技術體系建立,以及“海大金貝”、“蓬萊紅2號”等扇貝新品種的培育與推廣。王師教授在本項目中負責全基因組分型相關技術及算法研發,開發了新型、高效簡化基因組測序技術、無參基因組SNP分型新算法和軟件、低成本全基因組DNA甲基化檢測新技術MethylRAD等,為實現水產經濟生物全基因組選擇育種和分子標記輔助育種等奠定關鍵技術平臺。胡曉麗教授在本項目中負責貝類分子標記輔助育種技術研發,構建了扇貝高精度遺傳連鎖圖譜,定位了性狀相關基因,解析了扇貝TGF-B、IGF等信號通路基因變異與表達調控、表型性狀間的關系,為“海大金貝”等良種的選育提供了關鍵基因和位點。李恒德研究員自2008年起與包振民教授團隊合作,并在包振民教授實驗室完成了“基因組選擇算法設計及程序開發”的博士后研究工作,在本項目中負責貝類全基因組選擇算法研發及優化,研發了LASSO-GBLUP和gsbay基因組選擇軟件、基因組選擇模擬分析軟件gsim等系列軟件,為建立具有自主知識產權的貝類全基因組選擇育種評估系統平臺奠定重要基礎。獐子島集團股份有限公司與包振民教授長期開展扇貝育種研究,公司常務副總裁梁峻在本項目中參與了扇貝良種培育技術體系的建立,負責“海大金貝”的培育,家系和群體的維護和保種,以及大規模苗種生產及推廣。煙臺海益苗業有限公司自2009年起與包振民教授合作開展總扇貝良種選育和苗種繁育,公司總經理王有廷在本項目中參與了扇貝良種和品系性能測試,負責扇貝良種和品系大規模苗種生產及推廣。

    相關資訊

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